Recuento para establecer VR de cepas

Hola a todos.

Me gustaría lanzaros una pregunta.

Yo tengo cepas de reserva congeladas. Cuando quiero realizar un control interno de recuperación, saco la cepa del congelador y la revivifico en TSB 24H a 37ºC (de manera general). Cuando ha transcurrido ese tiempo, realizo una batería de diluciones, desde la cero que sería el tubo de TSB, hasta la -7. Una vez que tengo todas estas diluciones cuantifico la cepa sembrando cinco placas de 1 ml de los tubos de diluciones -7, -6 y -5.

Es decir, del tubo -7 siembro cinco placas con un volumen de 1 ml del tubo en TSA. Asi hago tb con el tubo de dilución -6 y -5.

Estas placas las incubo 24h a 37ºC. Transcurrido ese tiempo realizo el recuento de las placas. Supongamos que mis recuentos han sido los siguientes:

- tubo dilución -7: 17, 8, 18, 15 y 23. La media de esto me daría 16 ufc/ml
- tubo de dilución -6: 177, 178, 177, 180 y 180. La media es 180 ufc/ml

Para cuantificar la cepa, lo que hay en cada tubo, además realizo la media ponderada de los dos datos anteriores, es decir, 160 + 180 = 170 ufc/ml en el tubo -6. A partir de ahí determino que:

- tubo -7: contiene 17 ufc/ml
- tubo -6: contiene 17e1 ufc/ml
- tubo -5: contiene 17e2 ufc/ml
- tubo -4: contiene 17e3 ufc/ml

y así sucesivamente hasta llegar a la dilución 0.


Me gustaría saber si estos cálculos están bien realizados? o el dato final se calcula utilizando la formula de recuento que hay en la norma 7218?

Os lo digo por que antes de mi auditoría, yo hubiera cogido la dilución -6 y mi valor hubiera sido la media de las cinco placas de la dilución. Tras auditarme Doña Concha Carbonell, aplico lo descrito anteriormente por que ella así me lo exige.

De hecho os lanzo ésta pregunta porque me están pidiendo aclaraciones al PAC presentado y una de ellas es sobre este tema.

Os agradecería mucho vuestra ayuda

Muchas gracias